一般使用注意事項(xiàng)
色譜柱的劇烈震動(dòng)可能導(dǎo)致柱床斷層,因此使用過(guò)程中需要避免強(qiáng)烈撞擊、摔打,需輕拿輕放。
不同類型色譜柱耐壓能力不同,請(qǐng)?jiān)谝?guī)定的壓力范圍內(nèi)使用。
流動(dòng)相pH不要超過(guò)色譜柱pH使用范圍,特別是堿性較高的流動(dòng)相條件對(duì)色譜柱傷害較大,同時(shí)流動(dòng)相條件不要頻繁發(fā)生大幅度變化,否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱更容易劣化。
大曹三耀常見(jiàn)色譜柱pH使用范圍:
C18 MG 系列柱 pH2-10
C18 AQ 系列柱 pH2-9
C18 ACR 系列柱 pH1-10
C18 BB 系列柱 pH1-11
SCX柱 pH2-7
NH2柱 pH2-8
PC HILIC柱 pH3-7.5
為防止由異物進(jìn)入導(dǎo)致的色譜柱入口處過(guò)濾篩板堵塞,建議使用線上過(guò)濾器或預(yù)柱。
復(fù)雜基質(zhì)樣品有可能導(dǎo)致色譜柱的突然性堵塞或壽命減短,因此樣品需經(jīng)過(guò)充分前處理,可能情況下高速離心并過(guò)濾。
色譜柱一般使用柱溫為20-45℃,更高柱溫條件方法可以應(yīng)用,但一般情況下柱溫越高,色譜柱越易劣化。
更換流動(dòng)相時(shí)請(qǐng)注意流動(dòng)相之間的互溶情況,不要發(fā)生鹽析。
通常情況下,正相條件需要充分過(guò)渡,要避免儀器中殘留超純水的干擾。
實(shí)驗(yàn)完畢后,停止流動(dòng)相供液,在泵壓力指示降為0后再進(jìn)行色譜柱的安裝和拆卸,以免壓力急劇變化導(dǎo)致色譜柱損壞。
非C18系列色譜柱使用注意事項(xiàng)
1. 離子交換型色譜柱
1.1 一般使用注意事項(xiàng)同上
1.2 離子交換分析流動(dòng)相一般為含鹽水溶液或和有機(jī)溶劑的混合體系,新SCX柱、NH2柱均使用純乙腈封存,直接使用流動(dòng)相置換會(huì)導(dǎo)致鹽析,因此必須經(jīng)過(guò)水-有機(jī)相體系過(guò)渡后,才可使用流動(dòng)相。
1.3 離子交換型色譜柱不可用超純水沖洗或過(guò)渡,但可使用含有離子的水系流動(dòng)相。
1.4 新色譜柱初次使用平衡時(shí)間長(zhǎng),SCX、NH2柱使用含緩沖鹽流動(dòng)相時(shí),推薦使用流動(dòng)相小流速平衡過(guò)夜。
2. HILIC型色譜柱
2.1 一般使用注意事項(xiàng)同上
2.2 HILIC型色譜柱通常在70%以上乙腈條件下使用,乙腈比例過(guò)低會(huì)導(dǎo)致色譜柱壽命減短。
2.3 NH2色譜柱在HILIC模式分析下分析糖類物質(zhì),流動(dòng)相不得添加緩沖鹽。
2.4 新色譜柱初次使用平衡時(shí)間較長(zhǎng),一般需要2-4h流動(dòng)相平衡。
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