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經(jīng)典型HPLC分析柱操作過(guò)程中有哪些需要注意事項(xiàng)
更新時(shí)間：2021-09-18 點(diǎn)擊次數(shù)：1239次
賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱管內(nèi)填有顆粒大小均勻的固定相，一般商品化離子色譜分析柱填料主要用5~15μm顆粒的高分子聚合物小球，特定場(chǎng)合下也采用無(wú)機(jī)氧化物(如硅膠)顆粒，目前所用填料的顆粒主要為球形，而針對(duì)填料表面結(jié)構(gòu)性質(zhì)(孔隙的大小)，填料可以分離微孔型、大孔型和超孔型，隨著離子色譜應(yīng)用于復(fù)雜樣品越來(lái)越多，對(duì)交換容量要求也越來(lái)越高，超孔型填料也是離子色譜的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)。
賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱工作流程：高壓輸液泵將流動(dòng)相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系，在色譜柱之前通過(guò)進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入，流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱，在色譜柱中各組分被分離，并依次隨流動(dòng)相流至檢測(cè)器。抑制型離子色譜則在電導(dǎo)檢測(cè)器之前增加一個(gè)抑制系統(tǒng)，即用另一個(gè)高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中，流動(dòng)相背景電導(dǎo)被降低，然后將流動(dòng)出物導(dǎo)入電導(dǎo)池，檢測(cè)到的信號(hào)送至數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄、處理或保存。非抑制型離子色譜儀不用抑制器和輸送再生液的高壓泵，因此結(jié)構(gòu)相對(duì)比較簡(jiǎn)單，價(jià)格也相對(duì)比較便宜。
賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱操作過(guò)程中需要注意事項(xiàng)：
1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進(jìn)樣閥、柱子、檢測(cè)器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線，同時(shí)控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器之間連接管線的長(zhǎng)度。安裝色譜柱之前，確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對(duì)分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。
2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)醉佳的連接效果，應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭，如原來(lái)的接頭長(zhǎng)期匹配其他類型的色譜柱，建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況，避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK材料的通用接頭，只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手，使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過(guò)100℃。
