如果是遇到堵塞的情況,先要確定堵塞是由于什么原因引起的,如果是由于
F92533資生堂色譜柱中殘留的緩沖鹽引起的,這是輕微的堵塞了,可以嘗試用高比例的水相在較高的溫度下沖洗色譜柱。
如果是由于樣品原因?qū)е律V柱堵塞,又要考慮另外的辦法,如果是樣品中含有太多吸附性很強的物質(zhì)(有時是復(fù)雜樣品中的某些雜質(zhì),無法通過過濾離心等辦法去除)沉積吸附在柱頭導(dǎo)致堵塞,可以嘗試使用不同的溶劑(對此類物質(zhì)有較好溶解性的)慢慢沖洗。
如果是由于樣品過濾不當或者樣品在色譜柱上析出導(dǎo)致某些顆粒雜質(zhì)堵塞了色譜柱,除了嘗試尋找合適溶劑沖洗之外,只能考慮反沖了,通常,不建議反沖色譜柱,因為可能對色譜柱造成較大損害,所以反沖是迫不得已的死馬當活馬醫(yī)的辦法,一定要慎用。做好樣品的前處理并使用預(yù)柱或在線過濾器才是保護色譜柱的好辦法!
F92533資生堂色譜柱流動相中緩沖鹽的正確使用方法:
1、使用前的處理:在使用緩沖鹽作流動相之前需要用不含緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱,直至基線平穩(wěn)。原則上,用于沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于沖洗用的流動相中不含緩沖鹽。理由:緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機溶劑。用含緩沖鹽的(特別是做流動相的水為飽和的緩沖鹽溶液時)流動相進行分析時,如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小,不先沖洗掉,接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時,緩沖鹽將會在色譜柱柱體上析出,沉積下來,這將可能導(dǎo)致上述對色譜柱的損害。
2、使用后的處理:用與分析時含水比例相同的流動相(與分析用流動相的區(qū)別是,用于沖洗的流動相不含緩沖鹽)進行沖洗,直至基線平穩(wěn)。如果F92533資生堂色譜柱在接下來很長的一段時間內(nèi)不使用,要長期保存,則需再加上一步,即用純的有機溶劑沖洗一遍,直至基線平穩(wěn)。